| dc.creator |
Çağatay, Naciye Sena,
1991-
author
160644 |
|
| dc.creator |
Ay, Recep,
1970-
thesis advisor
14245 |
|
| dc.creator |
Çevik, Bayram,
1970-
thesis advisor
15244 |
|
| dc.creator |
Süleyman Demirel Üniversitesi.
Fen Bilimleri Enstitüsü.
Bitki Koruma Anabilim Dalı.
14246
issuing body |
|
| dc.date |
2016. |
|
| dc.identifier |
http://tez.sdu.edu.tr/Tezler/TF03620.pdf |
|
| dc.description |
Tetranychus urticae tarımda önemli zararlılardan biridir. Tarımda zararlılar ile mücadelede genellikle kimyasal savaşım tercih edilmektedir. Tetranychus urticae sahip olduğu biyolojik özelikler nedeniyle kullanılan kimyasallara kısa sürede direnç geliştirmektedir. Bu tez çalışmasında, cypermethrin ile 6 kez selekte edilen T. urticae (Koch) popülasyonunda cypermethrin’e karşı direnç gelişimi, direncin biyokimyasal ve moleküler mekanizması araştırılmıştır. Hassas T. urticae populasyonu GSS’den cypermethrin ile 6 kez seleksiyon yapılmıştır ve elde edilen cypermethrin dirençli populasyona C6 ismi verilmiştir. C6 populasyonu LC50 değeri hassas populasyonun LC50 değerine oranlandığında 54.24 kat direnç geliştirdiği belirlenmiştir. T.urticae ‘nin hassas GSS ve cypermethrin dirençli C6 populasyonlarında cypermethrin ile bazı sinerjistlerin [piperonyl butoxide (PBO), S-Benzyl-O,O-diisopropyl phosphorothioate(IBP) ve diethylmaleate (DEM)] sinerjistik etkileri incelenmiştir. C6 populasyonunda cypermethrin ile PBO, IBP ve DEM'nin sinerjistik oranları sırasıyla 1.41, 1.68 ve 2.27 kat olduğu belirlenmiştir. GSS populasyonunda sinerjist uygulamalarında herhangi sinerjistik etki gözlenmemiştir. GSS ve C6 populasyonlarında esteraz, glutathione S-transferaz ve sitokrom P450 sırasıyla α-naphthyl asetat, 1-chloro-2,4 dinitrobenzene (CDNB) ve 7-ethoxycoumarin (7-EC) subsratları kullanılarak belirlenmiştir. C6 populasyonunda esteraz, glutathione S-transferaz ve sitokrom P450 detoksifikasyon enzimleri hassas populasyonun detoksifikasyon enzim aktiviteleri ile karşılaştırıldığında sırasıyla 1.58, 1.16 ve1.35 kat daha yüksek olduğu bulunmuştur. Daha sonra hassas ve dirençli populasyonlardan genomik DNA izalosyonunda yapılmıştır. Elde edilen genomik DNA’lardan sodyum kanal geninin daha önce belirlenen mutasyonları taşıyan bölgeleri (F1538I,L1025V,A1215D) spesifik primerler kullanılarak PCR yöntemiyle çoğaltılmıştır. Çoğaltılan PCR ürünleri saflaştırıldıktan sonra dizileme servisine gönderilmiştir. Dizi analiz sonuçlarına bakıldığında hassas ve dirençli populasyonların DNA dizileri birbirleriyle karşılaştırılmasını sonucu herhangi bir mutasyon saptanamamıştır. Elde edilen sonuçlara göre, T. urticae'de cypertmethrin direncinde detoksifikasyon enzimleri rol oynabileceği kanısına varılmıştır. Anahtar Kelimeler: Tetranychus urticae, cypermethrin, direnç, detoksifikasyon enzimleri, mutasyon ,sinergist |
|
| dc.description |
The two-spotted spider mite, Tetranychus urticae Koch, is one of the most important agricultural pests in world-wide. T. urticae develops resistance against chemicals in short time because of its biological features. In this study, the biochemical and the molecular mechanism were investigated in the susceptible T. urticae population was selected with cypermethrin at 6 times. A susceptible strain T. urticae (GSS) was selected with cypermethrin for 6 selections in the laboratory. It was determined that when the LC50 value of the C6 population was proportioned LC50 value susceptible population, 54.24 fold resistance was developed. The obtained cypermethrin resistance population was named the C6.According to LC50, determined to develop 54.24 fold resistance when C6 population compare with GSS population. T.urticae in susceptible and cypermethrin resistance populations was examined sinergist effect on cypermethrin with some sinergists[piperonyl butoxide (PBO), SBenzyl- O,O-diisopropyl phosphorothioate(IBP) and diethylmaleate (DEM)]. Synergistic ratios on the cypermethrin resistance population in T. urticae were determined to be 1.41, 1.68 and 2.27- fold for piperonyl butoxide (PBO), - Benzyl-O,O-diisopropyl phosphorothioate (IBP) and diethylmaleate (DEM), respectively. Sinergism application was not observed any sinergist effect on susceptible population. The activities of esterase, glutathione S-transferase and cytochrome P450 was determined using α-naphthyl acetate, 1-chloro-2,4 dinitrobenzene (CDNB) and 7-ethoxycoumarin (7-EC) as substrate, respectively. In the C6 strain, activities of esterase, glutathione S-transferase and cytochrome P450 1.58, 1.16 and 1.35 fold higher, respectively, when compare with parental susceptible population (GSS). Afterwards, susceptible and resistance populations were performed genomic DNA isolation. The obtained genomic DNA’s containing previously identified mutations(F1538I,L1025V,A1215D) in sodium channel were amplified by PCR method using spesific primers. The amplified PCR products were pürified. The pürification products were send to sequencing service. As a result sequencing analysis, no previously identified and new mutations were determined by comparing the sequences of the susceptible and resistance populations. Consequently, our results evidence a detoxification based cypermethrin resistance mechanism associated with the resistance phenotype of the C6 strain. Keywords: Tetranychus urticae, cypermethrin resistance, detoxification enzymes, mutation |
|
| dc.description |
Tez (Yüksek Lisans) - Süleyman Demirel Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Bitki Koruma Anabilim Dalı, 2016. |
|
| dc.description |
Kaynakça var. |
|
| dc.description |
Tetranychus urticae tarımda önemli zararlılardan biridir. Tarımda zararlılar ile mücadelede genellikle kimyasal savaşım tercih edilmektedir. Tetranychus urticae sahip olduğu biyolojik özelikler nedeniyle kullanılan kimyasallara kısa sürede direnç geliştirmektedir. Bu tez çalışmasında, cypermethrin ile 6 kez selekte edilen T. urticae (Koch) popülasyonunda cypermethrin’e karşı direnç gelişimi, direncin biyokimyasal ve moleküler mekanizması araştırılmıştır. Hassas T. urticae populasyonu GSS’den cypermethrin ile 6 kez seleksiyon yapılmıştır ve elde edilen cypermethrin dirençli populasyona C6 ismi verilmiştir. C6 populasyonu LC50 değeri hassas populasyonun LC50 değerine oranlandığında 54.24 kat direnç geliştirdiği belirlenmiştir. T.urticae ‘nin hassas GSS ve cypermethrin dirençli C6 populasyonlarında cypermethrin ile bazı sinerjistlerin [piperonyl butoxide (PBO), S-Benzyl-O,O-diisopropyl phosphorothioate(IBP) ve diethylmaleate (DEM)] sinerjistik etkileri incelenmiştir. C6 populasyonunda cypermethrin ile PBO, IBP ve DEM'nin sinerjistik oranları sırasıyla 1.41, 1.68 ve 2.27 kat olduğu belirlenmiştir. GSS populasyonunda sinerjist uygulamalarında herhangi sinerjistik etki gözlenmemiştir. GSS ve C6 populasyonlarında esteraz, glutathione S-transferaz ve sitokrom P450 sırasıyla α-naphthyl asetat, 1-chloro-2,4 dinitrobenzene (CDNB) ve 7-ethoxycoumarin (7-EC) subsratları kullanılarak belirlenmiştir. C6 populasyonunda esteraz, glutathione S-transferaz ve sitokrom P450 detoksifikasyon enzimleri hassas populasyonun detoksifikasyon enzim aktiviteleri ile karşılaştırıldığında sırasıyla 1.58, 1.16 ve1.35 kat daha yüksek olduğu bulunmuştur. Daha sonra hassas ve dirençli populasyonlardan genomik DNA izalosyonunda yapılmıştır. Elde edilen genomik DNA’lardan sodyum kanal geninin daha önce belirlenen mutasyonları taşıyan bölgeleri (F1538I,L1025V,A1215D) spesifik primerler kullanılarak PCR yöntemiyle çoğaltılmıştır. Çoğaltılan PCR ürünleri saflaştırıldıktan sonra dizileme servisine gönderilmiştir. Dizi analiz sonuçlarına bakıldığında hassas ve dirençli populasyonların DNA dizileri birbirleriyle karşılaştırılmasını sonucu herhangi bir mutasyon saptanamamıştır. Elde edilen sonuçlara göre, T. urticae'de cypertmethrin direncinde detoksifikasyon enzimleri rol oynabileceği kanısına varılmıştır. Anahtar Kelimeler: Tetranychus urticae, cypermethrin, direnç, detoksifikasyon enzimleri, mutasyon ,sinergist |
|
| dc.description |
The two-spotted spider mite, Tetranychus urticae Koch, is one of the most important agricultural pests in world-wide. T. urticae develops resistance against chemicals in short time because of its biological features. In this study, the biochemical and the molecular mechanism were investigated in the susceptible T. urticae population was selected with cypermethrin at 6 times. A susceptible strain T. urticae (GSS) was selected with cypermethrin for 6 selections in the laboratory. It was determined that when the LC50 value of the C6 population was proportioned LC50 value susceptible population, 54.24 fold resistance was developed. The obtained cypermethrin resistance population was named the C6.According to LC50, determined to develop 54.24 fold resistance when C6 population compare with GSS population. T.urticae in susceptible and cypermethrin resistance populations was examined sinergist effect on cypermethrin with some sinergists[piperonyl butoxide (PBO), SBenzyl- O,O-diisopropyl phosphorothioate(IBP) and diethylmaleate (DEM)]. Synergistic ratios on the cypermethrin resistance population in T. urticae were determined to be 1.41, 1.68 and 2.27- fold for piperonyl butoxide (PBO), - Benzyl-O,O-diisopropyl phosphorothioate (IBP) and diethylmaleate (DEM), respectively. Sinergism application was not observed any sinergist effect on susceptible population. The activities of esterase, glutathione S-transferase and cytochrome P450 was determined using α-naphthyl acetate, 1-chloro-2,4 dinitrobenzene (CDNB) and 7-ethoxycoumarin (7-EC) as substrate, respectively. In the C6 strain, activities of esterase, glutathione S-transferase and cytochrome P450 1.58, 1.16 and 1.35 fold higher, respectively, when compare with parental susceptible population (GSS). Afterwards, susceptible and resistance populations were performed genomic DNA isolation. The obtained genomic DNA’s containing previously identified mutations(F1538I,L1025V,A1215D) in sodium channel were amplified by PCR method using spesific primers. The amplified PCR products were pürified. The pürification products were send to sequencing service. As a result sequencing analysis, no previously identified and new mutations were determined by comparing the sequences of the susceptible and resistance populations. Consequently, our results evidence a detoxification based cypermethrin resistance mechanism associated with the resistance phenotype of the C6 strain. Keywords: Tetranychus urticae, cypermethrin resistance, detoxification enzymes, mutation |
|
| dc.language |
tur |
|
| dc.publisher |
Isparta : Süleyman Demirel Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü, |
|
| dc.subject |
Süleyman Demirel Üniversitesi |
|
| dc.title |
Tetranychus urticae koch. (acari: tetranychidae)'de cypermethrin direncinin biyokimyasal ve moleküler karakterizasyonu = Biochemical and molecular characterization of cypermethrin resistance in tetranychus urticae koch. (acari: tetranychidae) / |
|
| dc.type |
text |
|