| dc.creator |
TÜRKANOĞLU ÖZÇELİK, Aysun; AKDENİZ ÜNİVERSİTESİ |
|
| dc.creator |
TORUN, Ayşe; AKDENİZ ÜNİVERSİTESİ |
|
| dc.creator |
YILMAZ, Semiramis; AKDENİZ ÜNİVERSİTESİ |
|
| dc.creator |
İNAN, Mehmet; AKDENİZ ÜNİVERSİTESİ |
|
| dc.date |
2018-09-20T00:00:00Z |
|
| dc.date.accessioned |
2019-07-09T12:00:37Z |
|
| dc.date.available |
2019-07-09T12:00:37Z |
|
| dc.identifier |
http://dergipark.org.tr/sdufenbed/issue/39132/472329 |
|
| dc.identifier |
10.19113/sdufenbed.472329 |
|
| dc.identifier.uri |
http://acikerisim.sdu.edu.tr/xmlui/handle/123456789/46839 |
|
| dc.description |
Insulin is a peptide hormone, produced by beta cellsof the pancreas, and regulates the glucose homeostasis in the body. Diabetesmellitus is a metabolic disease in which a person has high blood sugar, eitherbecause the pancreas does not produce enough insulin, or because cells do notrespond to produced insulin. At the present time, insulin is used to treatmentof this disease. Insulin hormone is first protein produced recombinantly byusing genetic engineering techniques. Firstly, it was produced in E. coli and Saccharomycescerevisiae, butrecently the number of studies that used Pichiapastoris (Komagataella phaffi) in the production of recombinant insulinincrease. In this study, in order to produce human insulin hormone precursor(IP) under the  inducible AOX1 promoter in P. pastoris, an expression vector encoding desired protein wasobtained by transferring DNA fragment coding this protein to the plasmid usingmolecular biology techniques such as transformation and ligation. Expressionvector was transferred via electroporation to Pichia pastoris  X33 strainwhich rendered by lithium acetate method. After protein expression study in 5Lbioreactor, obtained samples were analyzed with SDS-PAGE and ELISA methods anddetermined 7.5 mg/L protein produced. |
|
| dc.description |
İnsülinpankreasın beta hücrelerinden üretilen ve vücutta glukoz dengesini sağlayanönemli bir peptit hormondur. Pankreasın yeterli miktarda insülin üretememesi yada hücrelerin üretilen insüline cevap verememesi sonucu kan glukoz düzeyininyükselmesiyle diyabet adı verilen metabolik bir hastalık meydana gelir.Günümüzde bu hastalığın tedavisinde insülin hormonu kullanılmaktadır. İnsülinhormonu genetik mühendisliği teknikleri kullanılarak rekombinant olaraküretilen ilk proteindir. İlk olarak Escherichiacoli ve Saccharomyces cerevisiae’da üretilmeye başlanmış, ancak son zamanlarda rekombinant insülin üretiminde Pichia pastoris (Komagataella phaffi) ’in  kullanımıyaygınlaşmıştır. Bu çalışmada, insan insülin hormonu öncülerinin (IP) P. pastoris’in metanol ileindüklenebilir AOX1 promotoru altındaüretimini sağlamak amacıyla; bu proteini kodlayan DNA fragmenti transformasyonve ligasyon gibi moleküler biyoloji teknikleri kullanılarak plazmide aktarılarakistenen proteini kodlayan bir ekspresyon vektörü elde edilmiştir. Ekspresyonvektörünün lityum asetat yöntemiyle yetenekli hale getirilen P. pastoris X33 suşuna elektroporasyonlatransferi sağlanmıştır. 5L ölçekli biyoreaktörde yapılan protein ekspresyonuçalışması sonrasında alınan örnekler SDS-PAGE ve ELISA yöntemleriyle analizedilmiş ve 7.5 mg/L IP proteini üretildiği tespit edilmiştir. |
|
| dc.format |
application/pdf |
|
| dc.language |
tr |
|
| dc.publisher |
Süleyman Demirel University |
|
| dc.publisher |
Süleyman Demirel Üniversitesi |
|
| dc.relation |
http://dergipark.org.tr/download/article-file/556915 |
|
| dc.source |
Volume: 22, Issue: 3
1190-1196 |
en-US |
| dc.source |
1308-6529 |
|
| dc.subject |
Insulin,Pichia pastoris,AOX1 promoter,Recombinant protein |
|
| dc.subject |
İnsülin,Pichia pastoris,AOX1 promotoru,Rekombinant protein |
|
| dc.title |
Cloning, Expression and Production in a Bioreactor of Human Insulin Precursor in Pichia pastoris under AOX1 Promoter |
en-US |
| dc.title |
İnsan İnsülin Hormonu Öncülerinin Pichia pastoris AOX1 Promotoru Altında Klonlanması, Ekspresyonu ve Biyoreaktörde Üretimi |
en-US |
| dc.type |
info:eu-repo/semantics/article |
|