Description:
Myrosinaz glukosinolatların hidrolizinden sorumlu bir enzimdir (E.C: 3.2.3.2 β-thioglucosidase, β-thioglucosideglucohydrolase olarak da bilinir). Kanserle mücadele için umut verici bileşikler olarak kabul edilen sinigrin, glukoraphanin (GRA) veglukoraphenin (GRE) gibi ara yıkım ürünlerinden dolayı bazı alifatik glukosinolatlar oldukça ilgi çekmiş ve myrosinaz enziminin butümör küçültücü etkisi son yıllarda önem kazanmıştır.Bu çalışmada, myrosinaz amonyum sülfat çöktürmesi, Q-sepharose, Konkanavalin A sepharose afinite kromatografisi ileHindiba'dan (Cichorium intybus'un L.) homojen olarak saflaştırıldı. Saflaştırılan protein SDS- poliakrilamid jel elektroforezinde 35kDa ağırlığında tek bir bant olarak gözlenmiştir. Enzim pH 8,0'de ve 70 °C' de maksimum aktivite göstermiştir. Saflaştırılmış enzim1 yıldan fazla süreyle 4° C de sabit kalmıştır. Substrat olarak sinigrin kullanılarak, saflaştırılmış enzim için KM ve Vmax değerlerisırasıyla 0,02 ve 0,074 μmol glukoz. min–1.mg–1 olarak belirlenmiştir. Enzim askorbik asit (AA), EDTA, SDS ve β-merkaptoethanoltarafından güçlü bir şekilde aktive edilmiştir. Buna ek olarak, bazı iyonların myrosinaz enzim aktivitesi üzerine 10, 1 ve 0,1 mM'lıkkonsantrasyonlardaki etkileri (Cu2+, Ni2+, Ca2+) incelenmiş ve enzim aktivitesini önemli ölçüde etkiledikleri belirlenmiştir. Hindiba(Cichorium intybus'un L.)'dan elde edilen myrosinaz enziminin kozmetikte kullanılabilirliliği araştırılmıştır. Çalışmada safmyrosinaz enzimi içeren krem oluşturulmuş ve karışım güneş lekesi ve benzeri cilt sorunları olan 10 gönüllü denek üzerinde 20 günsüreyle uygulanmıştır. Belirlenen gün sonunda deneklerde mevcut olan lekelerin şiddetinde kısmi azalmalar gözlenmiştir.